استفاده در نظر گرفته شده

تست ترکیبی دنگی NS1 Ag-IgG/IgM یک روش ایمونواسی کروماتوگرافی سریع برای تشخیص کیفی آنتی بادی ها (IgG و IgM) و آنتی ژن NS1 ویروس دنگی به ویروس دنگی در سرم یا پلاسما برای کمک به تشخیص عفونت ویروسی دنگی است.

[خلاصه]

تب دنگی یک بیماری عفونی حاد ناشی از ویروس دنگی است که توسط پشه ها منتقل می شود.عفونت ویروس دنگی می تواند منجر به عفونت مغلوب، تب دنگی، تب خونریزی دهنده دنگی، تب خونریزی دهنده دنگی شود.تظاهرات بالینی معمول تب دنگی شامل شروع ناگهانی، تب بالا، سردرد، درد شدید عضلات، استخوان و مفاصل، بثورات پوستی، تمایل به خونریزی، بزرگ شدن غدد لنفاوی، کاهش تعداد گلبول های سفید خون، ترومبوسیتوپنی و غیره در برخی از بیماران است.این بیماری اساساً در مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری محبوبیت دارد، زیرا این بیماری توسط پشه Aides منتقل می شود، دلیل محبوبیت فصلی خاصی دارد، در هر سال معمولاً در ماه می تا نوامبر، اوج آن در جولای تا سپتامبر است.در منطقه اپیدمی جدید، جمعیت به طور کلی مستعد است، اما بروز عمدتا بزرگسالان است، در منطقه آندمیک، شیوع عمدتا کودکان است.

اصل

تست ترکیبی دنگی NS1 Ag-IgG/IgM یک سنجش ایمنی مبتنی بر نوار غشایی کیفی برای تشخیص آنتی بادی های ویروس دنگی (IgG و IgM) و آنتی ژن NS1 ویروس دنگی در سرم یا پلاسما است.

برای تست IgG/IgM: دستگاه آزمایش شامل: 1) یک پد مزدوج رنگی شرابی حاوی آنتی ژن های پوششی نوترکیب دنگی کونژوگه با طلای کلوئیدی (مزوجات دنگی)، 2) یک نوار غشایی نیتروسلولزی حاوی دو خط آزمایش (خط T1 و T2) و یک خط کنترل (خط C).خط T1 با آنتی بادی برای تشخیص ضد دنگی IgM و خط T2 با آنتی بادی برای تشخیص ضد دنگی IgG پوشیده شده است.هنگامی که حجم کافی از نمونه آزمایش در چاه نمونه کاست آزمایش توزیع می شود، نمونه با عمل مویرگی در سراسر کاست مهاجرت می کند.ضد دنگی IgG، اگر در نمونه وجود داشته باشد، به کونژوگه های دنگی متصل می شود.سپس ایمونوکمپلکس توسط معرف از قبل پوشش داده شده روی باند T2 گرفته می شود و یک خط T2 رنگ شرابی را تشکیل می دهد که نشان دهنده نتیجه آزمایش IgG دنگی مثبت است و عفونت اخیر یا تکراری را نشان می دهد.ضد دنگی IgM در صورت وجود در نمونه به مزدوج های دنگی متصل می شود.سپس ایمونوکمپلکس توسط معرف پوشش داده شده بر روی خط T1 گرفته می شود و یک خط T1 رنگ شرابی را تشکیل می دهد که نشان دهنده نتیجه آزمایش IgM دنگی مثبت است و عفونت تازه را نشان می دهد.عدم وجود هر گونه خطوط T (T1 و T2) نشان دهنده نتیجه منفی است.

برای تست NS1: در این روش تست، آنتی بادی ضد دنگی NS1 در ناحیه خط تست کاست بی حرکت می شود.پس از اینکه یک نمونه خون کامل / سرم / پلاسما در چاه نمونه قرار گرفت، با ذرات پوشش داده شده آنتی بادی ضد دنگی NS1 که روی پد نمونه اعمال شده اند واکنش نشان می دهد.این مخلوط از نظر کروماتوگرافی در طول نوار آزمایش مهاجرت می‌کند و با آنتی‌بادی ضد دنگی NS1 تثبیت‌شده تعامل دارد.اگر نمونه حاوی آنتی ژن NS1 ویروس دنگی باشد، یک خط رنگی در ناحیه خط آزمایش ظاهر می شود که نشان دهنده نتیجه مثبت است.اگر نمونه حاوی آنتی ژن NS1 ویروس دنگی نباشد، خط رنگی در این ناحیه ظاهر نخواهد شد که نشان دهنده نتیجه منفی است.

برای اینکه به عنوان یک کنترل رویه ای عمل کند، همیشه یک خط رنگی در ناحیه خط کنترل ظاهر می شود که نشان می دهد حجم مناسبی از نمونه اضافه شده است و فتیله غشایی رخ داده است.

ذخیره سازی و پایداری

به صورت بسته بندی شده در کیسه در بسته در دمای اتاق یا در یخچال (4-30 درجه سانتیگراد یا 40-86 درجه سانتیگراد) نگهداری کنید.دستگاه تست تا تاریخ انقضای چاپ شده روی کیسه مهر و موم شده پایدار است.

آزمایش باید تا زمان استفاده در کیسه مهر و موم شده باقی بماند.

جمع آوری و آماده سازی نمونه

1. تست ترکیبی دنگی NS1 Ag-IgG/IgM را می توان روی سرم یا پلاسما انجام داد.

2. جمع آوری نمونه های خون کامل، سرم یا پلاسما به دنبال روش های منظم آزمایشگاهی بالینی.

3. آزمایش باید بلافاصله پس از جمع آوری نمونه انجام شود.نمونه ها را برای مدت طولانی در دمای اتاق قرار ندهید.برای نگهداری طولانی مدت، نمونه ها باید زیر 20 درجه سانتیگراد نگهداری شوند.

4. نمونه ها را قبل از آزمایش به دمای اتاق برسانید.نمونه های منجمد قبل از آزمایش باید کاملاً ذوب شده و به خوبی مخلوط شوند.نمونه ها نباید به طور مکرر منجمد و ذوب شوند.

روش تست

قبل از آزمایش، اجازه دهید آزمایش، نمونه، بافر و/یا کنترل ها به دمای اتاق 15-30 درجه سانتیگراد (59-86 ℉) برسند.

1. قبل از باز کردن کیسه آن را به دمای اتاق برسانید.دستگاه تست را از کیسه مهر و موم شده خارج کرده و در اسرع وقت از آن استفاده کنید.دستگاه تست را روی یک سطح تمیز و صاف قرار دهید.

2. برای آزمایش IgG/IgM: قطره چکان را به صورت عمودی نگه دارید و 1 قطره از نمونه (تقریباً 10 میکرولیتر) را به چاه نمونه (S) دستگاه آزمایش منتقل کنید، سپس 2 قطره بافر (تقریباً 70 میکرولیتر) اضافه کنید و تایمر را شروع کنید.تصویر زیر را ببینید.

3. برای تست NS1: قطره چکان را به صورت عمودی نگه دارید و 8 تا 10 قطره سرم یا پلاسما (تقریباً 100 میکرولیتر) را به چاه نمونه (S) دستگاه آزمایش انتقال دهید، سپس تایمر را روشن کنید.تصویر زیر را ببینید.

4. منتظر بمانید تا خط(های) رنگی ظاهر شود.نتایج را در 15 دقیقه بخوانید.بعد از 20 دقیقه نتیجه را تفسیر نکنید.

تفسیر نتایج

مثبت:

برای تست IgG/IgM: خط کنترل و حداقل یک خط تست روی غشاء ظاهر می شود.ظاهر خط تست T2 نشان دهنده وجود آنتی بادی های IgG اختصاصی دنگی است.ظاهر خط تست T1 نشان دهنده وجود آنتی بادی های IgM اختصاصی دنگی است.و اگر هر دو خط T1 و T2 ظاهر شوند، نشان دهنده وجود هر دو آنتی بادی IgG و IgM اختصاصی دانگ است.هرچه غلظت آنتی بادی کمتر باشد، خط نتیجه ضعیف تر است.

برای تست NS1: دو خط ظاهر می شود.یک خط همیشه باید در منطقه خط کنترل (C) و یک خط رنگی دیگر باید در منطقه خط آزمایش ظاهر شود.

منفی:

یک خط رنگی در ناحیه کنترل (C) ظاهر می شود. هیچ خط رنگی ظاهری در منطقه خط آزمایش ظاهر نمی شود.

نامعتبر: خط کنترل ظاهر نمی شود.حجم نمونه ناکافی یا تکنیک های رویه ای نادرست محتمل ترین دلایل شکست خط کنترل هستند.روش را مرور کنید و آزمایش را با یک دستگاه تست جدید تکرار کنید.اگر مشکل همچنان ادامه داشت، استفاده از کیت تست را فوراً متوقف کنید و با توزیع کننده محلی خود تماس بگیرید.